冷冻手术

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TUhjnbcbe - 2020/12/18 13:11:00
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摘要

基于猪冷冻精液已开始步入商业化生产进程,该文分析了猪精液冷冻保存技术在国内大型猪育种企业中应用的重要性和必要性。目的在于促进猪精液冷冻保存技术带动养猪业发展实现革命性的飞跃。

关键词

猪;精液冷冻;育种企业

近10年来,随着可精准控制降温的专用精子冷冻仪的应用,及配套的母猪发情鉴定和深部位输精等技术的推动下,猪精液冷冻保存-人工授精技术体系日益成熟、已开始步入猪冷冻精液商业化生产进程。对大型猪育种企业而言,一方面,该技术能以冷冻精液的形式取代现有活体种猪销售,可以大幅度降低企业和客户的生产和引种成本,并具有较高的生物安全性;另一方面,能利用该技术对企业自身引进、自主培育的优秀种公猪的遗传资源实现有效保存,为将来猪育种工作提供丰富的遗传资源。

1猪精液冷冻保存技术发展概况

猪精液冷冻保存技术一般指利用液氮(-℃)作为冷源,经离心浓缩、添加保护成分并经过适当的降温平衡和冷冻,使精子细胞的代谢活动几乎完全停止,从而达到长期保存的目的。猪精液的冷冻保存最早始于20世纪50年代。早期试验中,解冻猪精液中有一定数量的活精子但无受精能力。一直到20世纪70年代,Polge等首次利用手术法将猪冷冻精液直接注入输卵管成功产下仔猪。猪冷冻精液剂型主要有颗粒、细管(0.5mL和5mL)和扁平袋(5mL)等。年,猪的颗粒和细管冷冻精液开始在猪育种中得到应用,但使用冷冻精液的母猪数量还不到受精总量的1%。迄今为止,国际上已经召开了8次关于猪精液冷冻保存的大型国际会议,全世界研究者们在保存方法、精液冷冻处理程序等方面作了大量的研究交流工作,对猪精液冷冻保存技术的发展和应用起到了积极的推动作用。我国猪精液冷冻保存技术研究略晚于国外。从20世纪60-80年代,我国在多个省市曾经大规模展开猪冷冻精液输精试验,如广西畜禽品种改良站试验的情期受胎率和平均窝产仔数分别为75.97%和9.42头。

与牛相比,猪精液量较大,精子对“冷休克”敏感,需要在冷冻前离心除去大部分精浆,且对降温平衡条件要求较高,导致猪精液冷冻难度大。猪为多胎动物,其冷冻精液能否应用取决于受胎率和窝产仔数2个指标(而牛冷冻精液仅涉及受胎率)。上述两方面因素制约了猪精液冷冻保存技术研究和应用。

近10年来,国内外猪精液冷冻技术发展主要在以下几方面:(1)广大研究者在猪冷冻稀释液方面,在冷冻保护剂、抗氧化、抗菌等成分筛选、添加做了大量研究工作,已有多个品牌的商业化冷冻稀释粉/液;(2)尤其精准降温的精子冷冻仪的使用,可为猪精子冷冻降温工艺实现最优化;(3)猪精液冷冻专用的精液分装、细管打印、封口等设备的应用,使猪冷冻精液规模化、标准化的商业生产成为可能;(4)与冷冻精液相配套的母猪发情鉴定和深部位输精技术也得到了较大发展,大大地推动了猪冷冻精液的广泛应用。近5年来,国内百钧达、北京田园奥瑞等公司通过技术引进结合自主研发,相继研发了猪精液冷冻保存技术,开发出精液冷冻稀释粉和生产设备,并以提供技术的形式与育种企业合作,实现猪冷冻精液的商业化生产、销售。

家畜精液冷冻保存技术的另一个用途是遗传资源保护(即“精子库”),相关工作始于20世纪70年代。在一些发达国家,如英国早在20世纪70年代就建立了家畜原种精子库,保存了30个牛品种和38个绵羊品种的冷冻精子;年联邦德国建立了牛的胚胎库,并用现代生物技术异地冷冻保存濒危牛的基因;前苏联也分别冷冻保存了26个品种牛和33个品种羊的数十万份精液。国内的家畜遗传资源保护手段相对落后,仍以传统的活体保种为主。“九五计划”中,鲁西*牛等地方牛品种精子库的建立,标志着精子冷冻保存技术开始用于我国家畜遗传资源保护。上海市农业科学院先后建成了本地区太湖猪类群(梅山猪、枫泾猪和沙乌头猪)的冷冻精子库及相应的遗传资源数据库。年,潍坊江海原种猪场与百钧达科技发展(北京)合作,开始利用现代化的猪精液冷冻技术共建山东首个猪冷冻精子库。

2国内大型猪育种企业建立优秀

种公猪“精子库”的迫切性和必要性

优秀种公猪是猪育种和商业化生产中最重要因素之一。近十余年来,由于国外育种水平和种猪生产性能的比较优势,国内大型猪育种企业耗费巨资从欧美养猪业发达国家大规模、持续引进优秀种公猪(品种主要为杜洛克、长白和大白)。数据显示,年共计引进种猪头,单次引种超过千头的企业有5家;年进口种猪总计约头;年仅曾祖代种猪引进头。其中,上海祥欣在年从美国引进头高端定制种猪。

普遍认为,尽管国内大型猪育种企业和科研单位在利用引进遗传资源联合育种工作卓有成效,但这种规模化、持续引进的局面在短时间内很难改变。由于引进种猪数量大且可使用年限短,导致其利用效率普遍不高,造成优秀猪遗传资源极大浪费。此外,由于技术和资金等因素限制,我国多数猪育种企业对优秀公猪遗传资源的有效保存不够重视。上述问题容易造成养猪业陷入“引种→维持→退化→再引种”的不良循环。而优秀种公猪种质资源现有保存手段主要有精液和体细胞的冷冻保存。大型育种企业可以将“精子库”建设与冷冻精液商业化生产同步进行,根据自有种公猪群体情况参照家畜遗传资源保护规程确定留种公猪,对精子耐冻性较差公猪则通过体细胞的采集、培养和冷冻保存,在需要的时候再用胚胎技术将公猪“复活”过来。

3大型猪育种企业以冷冻精液

取代活体种公猪输出的必要性

种公猪和精液销售是大型猪育种企业两大重要产品。种公猪的活体引种一直是国内外引种的主要方式,高昂的引种成本(包括购买和运输费用)及种公猪饲养和管理是导致养猪业利润微薄的一个重要因素。此外,对引入企业及周边地域而言,引入优质的遗传资源的同时也面对潜在的生物安全危机。*府已开始加强了对活体引种的规范和约束,先后出台了限制畜禽调运、加强畜禽移动监管等措施(《中华人民共和国农业农村部公告第2号》,年),然而年,先后在多地发现由活猪运输引起的非洲猪瘟疫情,惨痛的教训又一次为全社会敲响了生物安全警钟。

活猪跨省运输门槛的提高无疑会大大增加育种企业引种的难度和成本,预示着种公猪活体引种被严格限制和取代已是大势所趋。业内普遍认为,常温液态和冷冻保存精液是目前能取代种公猪活体引种的可行方式。现有技术条件下,猪常温液态保存精液可以在适宜温度(17℃)下的有效保存期普遍在3~5d,辐射地域则取决于运输条件。但其使用受时空限制明显,仅适合近距离、短期内使用。近几年来,国内猪精液冷冻技术已经突破商业化生产瓶颈,广东温氏、上海祥欣等国内知名育种企业已相继建立猪冷冻精液商业化生产平台,能为国内外客户提供优质遗传资源,并为客户提供配套的人工授精技术指导。此外,以购买冷冻精液的方式取代种公猪活体引种,不仅为引种公司安全生产提供有力保障,也能大幅度降低种猪饲养、管理及免疫等成本,从而提高企业的经济效益。

4小结

综上,推动国内大型猪育种企业独立或与相关科研单位及专门技术服务公司联合起来,实现猪冷冻精液商业化生产,能以冷冻精液的销售实现经济效益并同步实现种质资源保存,在推动我国养猪业实现育种跨越式、可持续发展具有重大意义。

猪业科学

本文选自《猪业科学》年第10期“遗传改良”栏目:P-(版权归《猪业科学》所有,如转载,请注明出处)。

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