北京中医治疗白癜风医院 https://4001582233.114.qq.com/Hello，小伙伴们，今天小编为大家分享动物、植物、细胞系、尿液代谢组样本搜集方法。篇幅有限，血清、血浆、粪便、微生物的样本搜集方法将于下周为您分享~
一、动物组织类样本收集参考步骤
1.样品量要求
GC-MS，LC-MS实验mg/sample。
2.样本收集步骤
1）如果组织上有血，用生理盐水漂洗掉。
2）根据具体实验设计取特定的部位，mg/sample装入离心管中。
3）标号后迅速放入液氮中冷冻处理至少15min，-80°C冻存；干冰寄送。
二、植物类样本收集参考步骤
1.叶片、茎、花
1.1样品量要求
GC-MS，LC-MS实验mg/sample。
1.2样本收集步骤
取整片叶片/一段茎/一朵花，用锡箔纸包裹并标记后，迅速放入液氮中冷冻处理至少15min。取出后迅速放入自封袋中(每组一袋)，在自封袋中放入标签纸注明样本信息。迅速放入-80°C冻存，干冰寄送。
1.3注意事项
1）采集叶片样本时，最好在中午光照好的时间收集。
2）要根据实验设计，采集样本时保持样本一致性，尤其是同一组样本（如颜色、衰老程度、叶脉占比、光照、位置等）。
2.根
2.1样品量要求
GC-MS，LC-MS实验mg/sample。
2.2样本收集步骤
1）取整株植物的根部，迅速用1*PBS漂洗掉根上的泥土。
2）根据具体实验设计取植株根特定的部位，mg/sample装入离心管中。
3）标号后迅速放入液氮中冷冻处理至少15min。-80°C冻存，干冰寄送。
2.3注意事项
1）PBS漂洗要快。
2）由于根部组织特别脆弱，被挤压后会变成浆糊状，所以推荐保存至离心管中，而不是锡箔纸包裹。
3.果实、种子
3.1样品量要求
GC-MS，LC-MS实验~mg/sample。
3.2样本收集步骤
1）对于含多汁、块头较大的果实（番茄、西瓜、苹果等）需要先用锋利的刀分割成“均匀”合适的小块(≈mg/sample)分装至2mL离心管中，标号后迅速放入液氮中冷冻处理。
2）对于细小的颗粒种子(拟南芥种子、谷物种子等)，可以先将同一组的植株种子混匀后再分装(≈mg/sample)至离心管中，标号后迅速放入液氮中冷冻处理。
3）对于要求对整个果实进行提取的（整粒葡萄等），需要把果实装在50mL离心管中/自封袋中，标号后迅速放入液氮中冷冻处理。
3.3注意事项
1）对多汁的果实进行取样很难保持均一性(如番茄、皮、果肉、果瓤、籽的占比)，建议将整个果实进行研磨、冻干，对粉末进行称重分装。
2）不推荐用锡箔纸包裹。
三、细胞样本收集参考步骤
适用细胞类型：哺乳动物细胞系
1.样品量要求
1*cell/sample，提供2份样本。
2.样本收集步骤
1）使用细胞计数器测定细胞数量，计算出所需淬灭缓冲液的量。以细胞数量1*为例，使用50mL圆锥形管一次处理样本最大量为8mL，若样本量8mL，就分开做；淬灭过程时间敏感，最好两个人操作。
2）将5倍样本体积的淬灭缓冲液加入50mL圆锥形管中。
3）在低温恒温器上预冷淬灭缓冲液至-40°C{淬灭缓冲液：60%（v/v）甲醇+0.85%（wt/v）碳酸氢铵（pH7.4，使用12M的盐酸调节pH）}。如果没有低温恒温器，可用干冰代替，并用低温温度计检测温度。
4）吸取1体积的细胞样本（1*），加入到盛有淬灭缓冲液的管中央，温度必须维持在-40°C左右，低于-45°C时，会导致细胞破碎，保证淬灭处理迅速。
5）手摇动混匀，不要用vortex。
6）g离心1min。
7）去除上清，当上清被去除干净后，继续贴壁吸取5s以保证上清完全被去除，因为粘在壁上的上清回落，会对后继操作带来负面影响。
8）使用μL-80°C的甲醇将细胞重悬，并转移到1.5mL的离心管中，标号后迅速放入液氮中冷冻处理，-80°C冻存，干冰寄送。
3.注意事项
1）淬灭缓冲液pH值要在每次适用前重新测定调整。
2）建议使用-40°C冰柜操作。
四、尿液样本收集参考步骤
1.样品量要求?
1mL/例。
2.样本收集步骤
晨起中段尿（临床）或晨间1h尿（动物）直接分装到离心管中，每管1mL，添加质量体积为0.5/(w/v)的叠氮化钠，-80°C冻存，干冰寄送。
3.注意事项
1）动物1h尿量不够，可分多次收集，若要收取24h尿液，请使用带有低温装置的代谢笼收取，并添加叠氮化钠。
2）叠氮化钠的作用是防腐杀菌，有*，请万分小心。
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参考文献
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[4]BeckonertO,KeunHC,EbbelsTMD,etal.Metabolicprofiling,metabolomicandmetabonomicproceduresforNMRspectroscopyofurine,plasma,serumandtissueextracts[J].NatureProtocol,7,2(11):-.
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