在冻存管冷冻过程中，管内会形成真空，真空的大小取决于填充的体积（冷冻体积）。当冻存管被储存在液态氮中，液态氮可能按一定比例进入内部真空中，从液态氮中取出或解冻管子时气体状态可能会发生变化，内部压力作用于试管，可能导致污染物质被释放，甚至管子爆裂。使用内螺旋盖和硅胶O型垫的CryoPure低温冻存管能够有效降低爆裂的可能性。另一方面，受污染的氮气一旦进入试管也会破坏样本的细胞成分，所以，基于安全考虑，我们建议冻存管应储存在液态氮的蒸汽态中。
安全操作注意事项
建议在液氮的蒸汽态下储存冻存管
使用带硅胶O型垫的内螺旋盖冻存管
将试管装满至标记处
用手将旋盖旋紧，不要过分旋紧或使用任何工具
穿着防护衣，戴上防护面罩、眼镜及手套
在解冻过程中把试管加盖放入容器中（例如：使用温水洗浴时）
请同时遵守您的实验室守则！
冷冻哺乳动物细胞标准规则
用PBS洗涤细胞
根据不同的细胞种类，用适当的方式分离细胞（例如用EDTA，酪氨酸或EDTA-酪氨酸的溶液处理细胞层）
用含血清的细胞培养基停止反应
使用Neubauer细胞计数板确定细胞数量
离心细胞（5min,×g，室温），去除上清
在一个含血清的培养基中重悬细胞团，使细胞浓度达到cells/ml
加入1体积的双倍浓缩冷冻培养基（如：50%培养基，30%FCS，20%DMSO），细胞数量约为5×cells/ml
加满CryoPure冻存管至标记处
将冷冻样本放在-80℃环境中，使冷冻速度达到1℃/min，细胞应该被储存在-80℃中至少6小时。根据不同细胞种类，有些细胞也可能在-80℃中存活几天
将试管移至液氮储存罐中
标准解冻规则
快速将CryoPure冻存管从液态氮中取出，放入37℃的温水槽中
解冻后，在70%的酒精中简单消*。干燥后将细胞悬浮物放入15ml离心管中
加入细胞培养基，离心（×g，5min）
去除上清，用新鲜培养基重悬细胞
转移至细胞培养瓶中培养
促销活动进行中
预览时标签不可点收录于话题#个上一篇下一篇
